T细胞亚群表型检测

按照表面分子标志的不同，淋巴细胞亚群可以分为T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群、NK细胞亚群和DC亚群等，和DC亚群等，例如T细胞主要测定细胞膜上的分化抗原群：CD3、CD4和CD8。CD3为所有T细胞的特有标志，CD4是辅助性T细胞(helper T cell,Th)的标志，CD8是细胞毒性T细胞(或抑制性T细胞的标志。

根据T细胞亚群(T lymphocyte subpopu-lation)的表面标志或者其他标志，用适当的荧光素标记特异性单克隆抗体与淋巴细胞反应，通过流式细胞仪测定，即可了解相应细胞的阳性百分比和荧光强度。
一般CD3+细胞主要分为两群细胞：CD3+ CD4+细胞为Th细胞，CD3+ CD8+为Tc/Ts细胞。

目前国内尚无统一的参考区间，一般建议的参考区间为CD3：61%~85%；CD4：28%~58%；CD8：19%~48%；CD4/CD8：1.5~2.5。
各实验室应建立自己的参考区间。如用文献或说明书提供的参考区间，使用前应加以验证。

1. 方法学特点 FCM方法采用流式细胞仪进行简单方便，重复性好，已经成为临床实验室主要的检测方法；免疫荧光法与一般间接免疫荧光法相同，因其方法容易引起荧光淬灭，而且主观性比较强，在临床中使用较少。而AP-AAP桥联酶免疫法是采用桥联酶免疫法，操作烦琐，抗体浓度及孵育温度等不易掌握，在临床中使用较少。
2. 对于CD4细胞或者CD8细胞进行分析时，严格来说应使用CD3/CD4/CD8三色荧光，真正的T辅助细胞应是CD3+CD4+CD8~,真正的T杀伤细胞或者抑制细胞应是CD3CD4ˉCD8。
3. 对荧光素标记抗体用量应做预试验，以找到最佳抗体使用浓度。
4. 每份样品检测的同时必须设置同型对照，即用荧光素标记的正常小鼠Ig(Ig亚类与荧光抗体相同)与荧光素标记的抗CD单抗同时检测。在分析待测血样结果时应减去同型对照的阳性结果，或以同型对照管为阴性管。
5. 在进行多色荧光样本分析时，应注意不同荧光染色所带来的颜色干扰，需要进行相应的颜色补偿设置。

1. CD4淋巴细胞减少
见于巨细胞病毒感染、慢性活动性肝炎、恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。CD4绝对值的变化可用于艾滋病的免疫状态分析、疗效观察及预后判断。

2.CD8淋巴细胞增多
见于传染性单核细胞增多症急性期、自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。

3. CD4/CD8比值异常比值降低：
SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、骨髓移植恢复期等。艾滋病患者比值显著降低，多在0.5以下。比值增高：见于肺腺癌、扁平上皮癌、类风湿关节炎、1型糖尿病等。此外，还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排斥反应。